Entre 2015 e 2016, o Brasil e vários países do continente Americano vivenciaram a emergência de epidemias causadas pelo vírus Zika, com grande repercussão mundial por causa da ocorrência de malformações congênitas em crianças cujas mães se infectaram durante a gestação. Desde então, um dos principais desafios para o enfrentamento da zika tem sido a dificuldade para o diagnóstico laboratorial correto das infecções causadas pelo vírus. Isso porque o vírus da zika apresenta similaridade com outros vírus da mesma família, os chamados “flavivirus”, o que muitas vezes impede uma acurada distinção das infecções causadas por eles.

Por isso, estudiosos do Brasil, Estados Unidos e Argentina avaliaram a capacidade de dois testes sorológicos, comercialmente disponíveis e aprovados pela ANVISA para uso no Brasil, em identificar infecções causadas pelo Zika. Os testes avaliados foram o IgM-ELISA, que é indicado para detectar uma infecção pelo vírus Zika ocorrida recentemente, e o IgG-ELISA que é usado para verificar se a pessoa testada já foi infectada pelo vírus Zika em qualquer momento durante a vida. Ambos os testes são produzidos pela Euroimmun.

Os resultados dessa investigação foram divulgados no artigo científico Diagnostic performance of commercial IgM and IgG enzyme-linked immunoassays (ELISAs) for diagnosis of Zika virus infection, publicado no Virology Journal. O estudo, coordenado pelo pesquisador da Fiocruz Bahia, Guilherme Ribeiro, avaliou a performance dos testes sorológicos em amostras de soros de pacientes que tinham o diagnóstico de Zika confirmado previamente por um teste molecular e também em amostras de pessoas que não tinham infecção pelo vírus (pacientes com confirmação do diagnóstico de dengue e doadores de sangue).

Os pesquisadores concluíram que o teste IgM-ELISA apresentava alta especificidade, ou seja, apresentava corretamente resultados negativos em amostras de soro de pacientes que não tinham Zika, mas pouca sensibilidade, o que significa que não conseguiam identificar a infecção nas amostras de pacientes que tinham o diagnóstico de Zika confirmado pelo teste molecular de referência.Em comparação, embora o teste IgG-ELISA tenha apresentado uma boa capacidade de identificar corretamente aqueles que já tiveram uma infecção pelo vírus Zika, ele mostrou baixa especificidade, particularmente para pacientes previamente expostos a infecções por dengue, o que significa que o teste apresentava um resultado falsamente positivo em pacientes que não tiveram Zika, mas tiveram dengue.

Estes resultados sugerem que o teste IgM-ELISA para Zika não é útil para confirmar um diagnóstico de Zika em pacientes que são suspeitos da doença, enquanto que o teste IgG-ELISA é mais adequado para o diagnóstico de Zika entre viajantes, que residem em áreas livres de transmissão de flavivirus e nunca foram infectados pelo vírus da dengue, mas que teria pouca utilidade em localidades onde o vírus da dengue é endêmico como no Brasil.

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Um estudo liderado por pesquisador da Fiocruz Bahia trouxe avanços ao realizar a integração de dados sobre o genoma, proteoma e metabolismo da “superbactéria” Klebsiella pneumoniae. Ao encontrar as proteínas que devem ser “atacadas” para fragilizar o organismo, o achado permite que sejam produzidos novos antibióticos mais precisos e potentes. O objetivo da pesquisa foi recolher e analisar os dados referentes às superbactérias e leva-los à comunidade científica para fortalecer a luta contra esse microrganismo.

O artigo intitulado An integrative, multi-omics approach towards the prioritization of Klebsiella pneumoniae drug targets, publicado na revista Scientific Reports, do grupo Nature, descreveu o trabalho realizado pelo pesquisador do Centro de Integração de Dados e Conhecimentos para Saúde (Cidacs/ Fiocruz Bahia), Pablo Ivan Pereira Ramos, em coautoria com Darío Porto, da Universidade de Buenos Aires, com a colaboração de outros pesquisadores de instituições do Brasil, Argentina e França.

A resistência de microorganismos a antibióticos tem sido um problema em diversos países, o que levou a Organização das Nações Unidas (ONU), em 2016, a anunciar a resistência microbiana como uma crise mundial de saúde. Mais de 136 mil pessoas morrem vítimas de bactérias multirresistentes a antibióticos, somente nos Estados Unidos e na Europa, a cada ano; e alguns estudos chegam a prever que, em 2050, uma pessoa morrerá a cada 3 segundos em consequência de uma infecção resistente a antibióticos.

Bactérias da espécie Klebsiella pneumoniae são encontradas com mais frequência em cateter em adultos hospitalizados nas unidades de tratamento intensivo brasileiras, com 3 805 casos em 2015, de acordo com o último relatório da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa). Antibióticos da classe das polimixinas se tornaram o último recurso para o tratamento de infecções sérias causadas por K. pneumoniae multiresistentes, porém, um aumento importante nas taxas de resistência às polimixinas foi observada entre essas bactérias que já são resistentes a uma classe de antibióticos de amplo espectro chamada carbapenêmicos, limitando as opções terapêuticas. 

Os resultados da pesquisa apontaram para 29 proteínas da bactéria que participam em processos importantes da célula, tais como síntese lipídica, produção de cofatores e metabolismo basal, a partir de uma perspectiva de desenvolvimento de medicamentos. A equipe de estudiosos aplicou uma estratégia multidimensional de integração de dados para a priorização dos alvos em K. pneumoniae, priorizando aqueles cuja inativação (através de um fármaco, por exemplo) tivesse maior efeito deletério à bactéria patogênica, ao mesmo tempo minimizando sua atuação nas comunidades que compõem a microbiota intestinal humana, abrindo caminho para fármacos mais seletivos.

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Durante o surto dos arbovírus no Brasil, um estudo, coordenado pela pesquisadora Camila Indiani de Oliveira, da Fiocruz Bahia, foi realizado para avaliar o grau de risco de transmissão de Dengue, Zika e Chikunguya através de transfusão de sangue. A pesquisa foi feita após a constatação de infecção dessas doenças decorrente de transfusão de sangue contaminado pelos vírus, em alguns lugares do mundo. O trabalho foi descrito no artigo “Surveillance of donated blood during the 2016 arbovirus outbreak in Brazil”, publicado no Journal of Medical Virology.

Na pesquisa realizada na Fiocruz Bahia, em colaboração com pesquisadores da Fiocruz Paraná, da Universidade Federal da Bahia (UFBA/ campus Vitoria da Conquista) e do Instituto de Biologia Molecular do Paraná, as amostras de sangue de 676 doadores saudáveis usadas no estudo foram colhidas pelo Serviço de Hemoterapia do Sudoeste na cidade de Vitória da Conquista (BA), área com alto número de casos dessas doenças no período de 2015 e 2016.

Os autores verificaram que em nenhuma amostra de sangue foi detectada presença de vírus da Dengue, Zika ou Chikunguya, apesar do aumento de casos durante o período. Esses números diferem do resultado encontrando na Polinésia Francesa, por exemplo, onde foram colhidas 1505 amostras de sangue e 42 amostras (3%) foram positivas para Zika, embora os doadores não manifestassem sintomas na época da doação de sangue. Outro estudo realizado, em Ribeirão Preto (SP), mostrou que das 1393 amostras de sangue testadas, 2,7% foram positivas.

Apesar do número alto de casos de Dengue na área de Vitória da Conquista, comparado ao número de casos de Zika e Chikungunya, tal resultado sugere que o risco de contaminação por transfusão de sangue é baixo. Suspeita-se que os resultados positivos nas outras áreas são decorrentes dos números muito mais elevados de casos confirmados. Os pesquisadores sugerem uma estratégia de vigilância mais ativa para que haja controle da transmissão de arbovírus por transfusão sanguínea, por exemplo, especialmente na iminência de surtos como foi observado recentemente no Brasil.

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A pesquisadora do Instituto Gonçalo Moniz (IGM/ Fiocruz Bahia), Isadora Cristina de Siqueira, participou de um estudo que mostra uma possível relação entre arbovírus, como dengue, chikungunya e zika, com a polineuropatia sensorial reversível.

A pesquisa foi publicada no Journal of the Neurological Sciences, no artigo intitulado “Reversible sensory polyneuropathy during an arboviral outbreak in Salvador, Bahia, Brazil” e foi realizado em parceria com o Hospital Geral Roberto Santos e Hospital Santa Izabel, em Salvador; e com o Centro de Doenças Tropicais da Universidade do Texas, nos Estados Unidos. No trabalho, foi descrita uma série de casos de cinco pacientes.

Para o estudo, foram coletadas amostras de sangue e fluido cerebroespinhal dos pacientes e realizados testes sorológicos para arbovírus e exames de imagem para descartar outras doenças neurológicas. As manifestações neurológicas nos participantes foram consideradas leves, com duração de cerca de sete dias, e apenas um deles precisou ficar internado. Tais características dos sintomas não atendiam os critérios para Síndrome de Guillan-Barré, doença autoimune que acometeu diversos pacientes infectadas com arbovírus na época do surto, em 2015.

Os resultados dos exames mostraram que os pacientes apresentaram algum tipo de infecção por um dos vírus transmitidos por mosquito, tanto aguda quanto pregressa, e a maioria deles (80%) apresentou infecção recente por zika ou chikungunya. A neuropatia periférica associada à chikungunya já havia sido relatada em estudos anteriores, porém, essa foi a primeira descrição de um subtipo de neuropatia apenas sensitiva e reversível, com fortes evidências do vírus como causa.

Desta forma, esse estudo é importante para alertar médicos e profissionais de saúde sobre outras doenças neurológicas, possivelmente causadas por infeções por zika ou chikungunya, além das já relatadas durante o surto, como Guillan-Barré.

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Acredita-se que a citocina pró-inflamatória IL-1β desempenha um papel importante na proteção do hospedeiro contra a infecção por Mycobacterium tuberculosis, agente causador da tuberculose. Estudos realizados em camundongos geneticamente deficientes em IL-1β e IL-1α demonstram que esses animais são extremamente suscetíveis à doença, bem como a estimulação in vitro de macrófagos infectados pelo M. tuberculosis com IL-1β resulta em redução de cargas micobacterianas, o que demonstra a atividade anti-micobacteriana desta citocina. A produção excessiva da IL-1β, entretanto, tem sido associada com doença mais grave da tuberculose e aumento de pulmão.

Um estudo liderado pelo pesquisador da Fiocruz Bahia, Bruno Andrade, e pelo pesquisador do National Institutes of Health (NIH/EUA), Eduardo Amaral, identificou a relação entre a presença de catepsina lisossomal B (CTSB) e geração de IL-1β, após infecção por micobactéria in vitro. Os resultados podem ser acessados através do artigo Lysosomal Cathepsin Release Is Required for NLRP3-Inflammasome Activation by Mycobacterium tuberculosis in Infected Macrophages, publicado na revista científica Frontiers in Immunology. A CTSB tem sido proposta para desempenhar um papel na indução da inflamação aguda. Esta catepsina ativa no citosol, líquido que preenche as células, é crucial para a montagem do complexo proteico chamado inflamassoma NLRP3 e, consequentemente, para a geração de IL-1β.

Compreender as nuances da função da IL-1β na tuberculose torna-se fundamental no desenho de intervenções terapêuticas que atuam alterando seus níveis e sua atividade em um quadro inflamatório. De acordo com Andrade, o papel da IL-1 na tuberculose tem sido descrito como uma espada de dois gumes. Ao passo que é essencial para a imunidade contra a micobactéria, o excesso de produção está associado a dano tecidual colateral, conhecido como imunopatologia. Para o estudo, foram utilizadas amostras de 13 pacientes com diagnóstico de tuberculose pulmonar ativa, confirmada por cultura de escarro, e de 12 doadores de sangue saudáveis, que foram pareados por idade e sexo e recrutados entre 2012 e 2014. 

Os experimentos in vivo mostram que existe uma produção de IL-1 que independe do inflamassoma. Ensaios in vitro, por sua vez, mostram que a produção desta citocina por macrófagos infectados é dependente da ativação deste complexo molecular. “Ao reduzir a produção de IL-1 dependente do inflamassoma via inibição da catepsina B, é possível que consigamos reduzir a imunopatologia da tuberculose sem afetar a imunidade conta a micobactéria. Isto, portanto, abre possibilidades de intervenções terapêuticas focadas na redução da gravidade clínica e potencial prevenção de sequelas pulmonares resultantes de extensa destruição tecidual detectada em muitos casos desta doença”, explicou o pesquisador.

Os resultados da pesquisa apontam que o CTSB (e possivelmente outras catepsinas inibidas) é indutor chave da montagem e ativação do inflamassoma no contexto da infecção pelo M. tuberculosis. Os dados também demonstraram uma associação de níveis aumentados de CTSB com tuberculose ativa em pacientes e modelos animais. Os experimentos in vitro com macrófagos infectados com M. tuberculosis também indicam que essas elevações podem refletir aumentos nos níveis intracelulares da forma madura da enzima. Os achados deste estudo revelam um papel anteriormente não apreciado da atividade de catepsina dependente da proteína ESAT-6 na montagem de inflamassoma com NLRP3 e produção de IL-1 em macrófagos infectados por M. tuberculosis.

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 Em grávidas com Dengue Hemorrágica esse risco é de até 450 vezes mais

A dengue coloca um quarto da população mundial sob riscos de saúde, de acordo com a Organização Mundial da Saúde (OMS). Um estudo publicado nesta semana indica que atenção à mulher grávida infectada com dengue deve ser ainda maior, devido ao risco de morte ser três vezes maior do que em gestantes sem a doença. O risco de óbito materno chega a ser 450 vezes maior quando a mulher possui dengue hemorrágica, a forma mais grave da infecção.

O artigo tem como principal autora a epidemiologista Enny Paixão, pesquisadora do Centro de Integração de Dados e Conhecimento para Saúde (Cidacs/Fiocruz Bahia), e foi publicado com o título “Dengue in pregnancy and maternal mortality: a cohort analysis using routine data” no periódico Scientific Reports, da Nature, nesta segunda-feira, 2 de julho.

O estudo faz parte da tese de doutorado de Paixão, realizado na London School Hygiene of Tropical Medicine, sob a orientação da professora Laura Rodrigues. No ano passado, a pesquisa conduzida por Paixão já havia relacionado à dengue durante a gestação com o aumento do risco de óbito fetal. Além do Cidacs-Fiocruz Bahia, da London School, a pesquisa foi feita com a participação também de pesquisadores do Instituto de Saúde Coletiva da Universidade Federal da Bahia (ISC/Ufba).

Metodologia

Para obter essas evidências, a pesquisa usou dados obtidos de bases governamentais, os chamados dados administrativos, dos Sistema de Informação sobre Nascidos Vivos (Sinasc), o Sistema de Informação de Agravos de Notificação (Sinan) e Sistema de Informação sobre Mortalidade (SIM). O estudo foi realizado por meio de técnica denominada linkage probabilístico, em que as informações (como nome e data de nascimento) de diferentes bases são cruzadas com o intuito de encontrar o mesmo indivíduo.

No período entre 1º de janeiro de 2007 e 31 de dezembro de 2012, houve 10.259 registros de óbitos maternos por diferentes causas. Para compor a amostra estudada, foram excluídas os registros de mulheres com diagnóstico de aborto ou com os óbitos fetais (pois o grupo de comparação eram nascidos vivos), os óbitos de mulheres que não foram associadas nem com os óbitos fetais, nem com os nascidos vivos,  e aqueles que não havia como atribuir a situação de dengue ou não. Assim ao final foram utilizados 4.053 mortes maternas e 17.391.826 nascidos vivos como grupo comparação.

Relevância

Os resultados encontrados no estudo demonstram a importância de priorizar os exames de diagnóstico de dengue durante o periodo gestacional. Quando a dengue foi diagnosticada por análise dos sintomas, esse grupo revelou três vezes mais riscos de morte. Já quando o diagnóstico foi confirmado por exame laboratorial, esse risco aumentou em oito vezes.

Já quando a paciente apresentou o quadro de dengue hemorrágica confirmado por análise laboratorial, houve o aumento de mortalidade materna em 450 vezes. Os autores destacam que mudanças fisiológicas na gestação podem mascarar sintomas de dengue hemorrágica, dificultando o diagnóstico. Isso implica que, provavelmente, há casos de dengue hemorrágica que chegaram ao óbito sem serem diagnosticados.

O estudo também observou que pré-eclâmpsia e eclâmpsia, complicações associadas ao descontrole da pressão arterial na gravidez, eram mais frequentes no grupo com dengue. “No nosso estudo achamos que a frequência dessas complicações foi maior no grupo com dengue do que no grupo comparação, mas outros estudos precisam ser feitos para verificar essa relação”, afirmou a pesquisadora Enny Paixão. “Quando a infecção for diagnosticada, a paciente deve ser acompanhada de perto para se evitar o óbito”, diz.

Mortes maternas

Para o estudo, foi utilizada a definição da 10ª revisão da Classificação Internacional de Doença (CID-10) em que é considerada morte materna “a morte de uma mulher durante a gestação ou dentro de um período de 42 dias após o término da gestação, independentemente da duração ou da localização da gravidez, devida a qualquer causa relacionada com ou agravada pela gravidez ou por medidas em relação a ela, porém não devida a causas acidentais ou incidentais”, em conformidade com a OMS.

Reduzir a mortalidade materna é um Objetivos de Desenvolvimento do Milênio (ODM). No Brasil, de acordo com a publicação Saúde Brasil: 2017 – Uma análise da situação de saúde e os desafios para o alcance dos Objetivos de Desenvolvimento Sustentável, houve um aumento na vigilância de houve um aumento na investigação da morte materna o percentual de incremento de óbitos maternos entre a notificação do óbito e a classificação obtida após a investigação tem se mostrado inconstante entre as unidades da Federação ao longo dos anos. No Brasil, em 2015, o incremento foi de 28%, sendo os maiores incrementos observados na Região Sudeste (35%) e Nordeste (28%).

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Durante a picada do mosquito transmissor da leishmaniose, conhecido como o flebotomíneo, é depositado na pele do hospedeiro uma combinação de saliva, parasitas, dentre outros fatores derivados de parasitas. Pesquisas anteriores têm demonstrado que a exposição constante a picadas de flebotomíneos não infectados induz respostas imunoprotetoras à Leishmania, encorajando estudiosos a identificar potenciais moléculas candidatas a vacina contra a doença.

Uma equipe coordenada pela pesquisadora da Fiocruz Bahia, Claudia Brodskyn, realizou um estudo que se concentrou na análise da proteína salivar LJM11, identificada como molécula imunogênica em cães, camundongos e pessoas contaminadas pela doença. A pesquisa concluiu que a imunização com a LJM11 protege contra infecção por Leishmania braziliensis, na presença de saliva do mosquito Lutzomyia longipalpis, em modelo experimental, utilizando camundongos. Os resultados foram descritos em artigo intitulado Immunization with LJM11 salivary protein protects against infection with Leishmania braziliensis in the presence of Lutzomyia longipalpis saliva, publicado na revista científica Acta Tropica. 

No Brasil, os flebotomíneos são conhecidos por diferentes nomes de acordo com sua ocorrência geográfica, como tatuquira, mosquito palha, asa dura, entre outros. O uso de uma proteína salivar como componente da vacina anti-Leishmania tem sido amplamente discutido, entretanto, a variedade de moléculas salivares entre diferentes espécies de vetores deve ser considerada. Para o presente estudo, foram analisadas apenas as salivas de flebotomíneos das espécies Lutzomyia longipalpis e Lutzomyia intermedia.

A LJM11 pertence à família das proteínas “yellow” presentes na glândula salivar dos flebotomíneos Lutzomyia e Phlebotomus. Em estudos anteriores, foi demonstrada sua capacidade de induzir uma resposta imune celular em vertebrados e observado que a imunização com a LJM11 resultou em proteção contra a infecção por Leishmania major transmitida por Lutzomyia longipalpis, evidenciando a capacidade de proteção dessa molécula. Na pesquisa, também foi investigado se a imunização com LJM11 é capaz de induzir uma resposta de proteção cruzada contra a infecção por L. braziliensis na presença de Lu. longipalpis ou Lu. Intermedia.

Como resultado, verificou-se que a imunidade gerada pela LJM11 protege camundongos contra infecção por L. braziliensis na presença de Lu. longipalpis, mas não na presença de Lu. Intermedia. Os achados também demonstraram que a proteção induzida por LJM11 pode ser específica para Lu. Longipalpis, destacando a importância da identificação de candidatos a vacinas contra a proteção cruzada, especialmente quando se considera áreas endêmicas onde diferentes espécies de flebotomíneos transmitem as mesmas espécies de Leishmania. De acordo com os pesquisadores, estes e outros resultados da pesquisa ressaltam a importância de avaliar a especificidade das respostas protetoras mediadas por saliva. 

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