artigo científico – Instituto Gonçalo Moniz

Desempenho diagnóstico de proteínas para a doença de Chagas é tema de estudo

O pesquisador da Fiocruz Bahia, Fred Luciano, foi o primeiro autor do artigo Accuracy of chimeric proteins in the serological diagnosis of chronic chagas disease – a Phase II study, publicado no periódico PLOS Neglected Tropical Desease, no dia 8 de março. O trabalho, desenvolvido em parceria com o Instituto Carlos Chagas (Fiocruz Paraná), Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães (Fiocruz Pernambuco) e Biomanguinhos (Fiocruz-RJ), descreve um estudo de Fase II, que buscou testar o desempenho diagnóstico de quatro proteínas quiméricas para a doença de Chagas.

O diagnóstico laboratorial da doença de Chagas crônica é baseado na pesquisa de anticorpos específicos contra o parasita causador da doença, o Trypanosoma cruzi. Diversas metodologias diagnósticas estão comercialmente disponíveis, mas os seus desempenhos dependem da matriz antigênica utilizada para identificar estes anticorpos.

Neste estudo, os pesquisadores testaram, através de imunoensaio, o desempenho diagnóstico das proteínas quiméricas IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4, compostas por diversos epítopos repetitivos do parasita. Inicialmente, os antígenos foram expressos em Escherichia coli e purificados por métodos cromatográficos. Após esta etapa, foi avaliada a acurácia das proteínas em diagnosticar a doença de Chagas crônica, utilizando amostras de soro de 857 indivíduos portadores da doença e de 689 indivíduos não infectados.

Os resultados mostraram valores do odds ratio diagnóstico (ORD) – medida de eficácia de um diagnóstico – de 6.462 para o antígeno IBMP-8.1, 3.807 para o IBMP-8.2, 32.095 para o IBMP-8.3 e 283.714 para o IBMP-8.4, números superiores àqueles encontrados para alguns testes comerciais. Também foram analisadas 1.079 amostras de indivíduos positivos para outras doenças, para verificação de reações cruzadas, e o índice de reatividade encontrado foi considerado baixo, variando de 0,37% a 0,74%, mesmo para Leishmania spp., patógeno que apresenta similaridade antigênica com o T. cruzi.

O conjunto dos resultados permitiu concluir que as proteínas IBMP são estáveis e apresentaram resultados reprodutíveis. Além disso, os achados mostram que o antígeno IBMP-8.4 pode ser seguramente usado em testes sorológicos para T. cruzi, tanto para triagens em bancos de sangue quanto para o diagnóstico laboratorial da doença.

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Especialistas sugerem escala de pontuação de sinais clínicos para ajudar no diagnóstico da leishmaniose

Em artigo publicado no periódico “Memórias do Instituto Oswaldo Cruz”, em janeiro de 2017, pesquisadores discutem o desenvolvimento de uma escala de pontos para facilitar o diagnóstico da leishmaniose visceral canina. Intitulada Scoring clinical signs can help diagnose canine visceral leishmaniasis in a highly endemic area in Brazil, a publicação conta com a assinatura dos pesquisadores da Fiocruz Bahia Aldina Maria Prado Barral e Manoel Barral Netto, atual vice-presidente de Educação, Informação e Comunicação da Fiocruz.

A leishmaniose visceral é uma doença causada pela infecção do protozoário Leishmania infantum chagasi, transmitida através da picada do mosquito-palha e disseminada na América Latina. Caracteriza-se por febre de longa duração, perda de peso, astenia, adinamia e anemia. No Brasil, país onde ocorrem 90% dos casos na América Latina, mais de 3.300 pessoas são afetadas todo ano.

A zoonose, a princípio considerada rural, vem se expandindo para o meio urbano. Nas cidades, os cães são os principais reservatórios do parasita e, por essa razão, são considerados a principal fonte de infecção. Contudo, devido a uma limitação de recursos para diagnóstico em áreas endêmicas de leishmaniose visceral, a identificação dos cães infectados é dificultada.

Nesse contexto, em parceria com a Universidade Federal do Piauí, Universidade Federal da Bahia e o Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia, a equipe de especialistas propôs uma escala de pontuação com o potencial de distinguir casos positivos e negativos de infecção da leishmaniose visceral canina, que varia de acordo com sinais clínicos e gravidade das lesões. O trabalho foi desenvolvido com avaliação de 265 cães que apresentaram resultado positivo para leishmaniose visceral no teste diagnóstico ELISA e em testes parasitológicos.

Resultados – Constatou-se que cães infectados tiveram uma maior manifestação da maioria das evidências clínicas, previstos na escala de pontuação, como aumento dos gânglios linfáticos, lesões de focinho e orelha, estado nutricional, mucosa pálida, onicogrifose, lesões cutâneas, hemorragia, despigmentação do focinho, alopecia, blefarite e ceratoconjutivite em relação aos não infectados ou daqueles com erliquiose, que pode ser uma condição confundidora para o diagnóstico de LVC no Brasil.

Concluiu-se que a pontuação baseada nas evidências clínicas pode auxiliar veterinários a identificar de forma mais precisa cães infectados em áreas endêmicas, que contam com recursos limitados para o diagnóstico.

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Uso do rutênio (II) contra cânceres e doença de Chagas é publicado no Journal of Inorganic Biochemistry

Um estudo realizado por pesquisadores da Fiocruz Bahia aborda a versatilidade química dos complexos de rutênio no tratamento do câncer e da doença de Chagas. Os resultados da pesquisa estão no artigo “Ruthenium(II) complexes of 1,3-thiazolidine-2-thione: Cytotoxicity against tumor cells and anti-Trypanosoma cruzi activity enhanced upon combination with benznidazole”, publicado no periódico científico Journal of Inorganic Biochemistry.

Dentre os cientistas que participaram do estudo estão os pesquisadores Diogo Moreira e Milena Soares e os estudantes Cássio Meira e Jamyle dos Santos, da Fiocruz Bahia; realizado em parceria com a Universidade Federal de São Carlos (UFSCar), Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP), Universidade Federal de Uberlândia (UFU), Hospital São Rafael (Salvador), Universidade de São Paulo (USP) e EMBRAPA.

Em decorrência da elevada incidência dos cânceres de próstata e de mama, e a associação destes com um alto índice de mortalidade, o desenvolvimento de novas drogas contra a doença é de grande interesse. Hoje, medicamentos contendo metais de transição, como a cisplatina, são amplamente utilizados no tratamento de câncer, no entanto, têm sido observadas limitações em relação à resistência a esses quimioterápicos. Em contrapartida, os compostos de rutênio [Ru (II)] são fármacos promissores, pois possuem mecanismos de ação diferentes dos de compostos à base de platina e, nos últimos anos, têm sido introduzidos em ensaios clínicos; alguns destes complexos são promissores agentes antitumorais.

Ainda de acordo com o estudo, a doença de Chagas também pode ser tratada com o uso de compostos de rutênio. Atualmente, o tratamento é baseado apenas nos fármacos nifurtimox e benznidazol, que existem a mais de 50 anos e possuem baixa eficácia e altos níveis de toxicidade. Desde a descoberta da ação anti-Trypanosoma cruzi de complexos de rutênio, um grande número de complexos metálicos foi avaliado com este objetivo.

Método e resultados – Para realizar esta pesquisa, os cientistas sintetizaram três novos complexos mistos e mononucleares de rutênio (II). Os resultados demonstraram que alguns complexos de Ru (II) apresentaram maior efeito citotóxico contra linhagens celulares cancerígenas, em comparação com a cisplatina. Além disso, muitos destes complexos apresentaram atividade antiparasitária contra o parasito T. cruzi, agindo de forma sinérgica com a droga de referência, benznidazol; outros chegaram a causar morte celular do parasito através de um processo de necrose.

A partir do conjunto dos resultados, os cientistas chegaram à conclusão de que os complexos de Ru (II) têm forte atividade farmacológica. Os pesquisadores afirmam que a combinação de drogas é um aspecto importante na terapia anti-câncer e antiparasitária. Além disso, foi observado que o Ru (II) apresenta melhor atividade antiparasitária quando administrado em combinação com o benznidazol, o que revela que estes complexos são moléculas adequadas para composições de combinação de drogas.

Clique aqui para ler na íntegra o artigo publicado em janeiro de 2016.

European Journal of Medicinal Chemistry publica estudo sobre nova série de compostos contra doença de Chagas

O artigo Phthalimido-thiazoles as building blocks and their effects on the growth and morphology of Trypanosoma cruzi traz um estudo realizado pelos pesquisadores da Fiocruz Bahia, Diogo Moreira e Milena Soares e da doutouranda Tanira Bastos, que aborda a síntese e a atividade anti- Trypanosoma cruzi de uma nova série de compostos químicos da classe de ftalimidos-tiazóis. Publicada no European Journal of Medicinal Chemistry, a pesquisa foi realizada em parceria com o Hospital São Rafael (Salvador), o Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães (Fiocruz Pernambuco) e a Universidade Federal de Pernambuco (UFPE).

A doença de Chagas é uma infecção parasitária causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, que afeta entre 6 e 7 milhões de pessoas no mundo. Os medicamentos existentes para o tratamento da doença de Chagas, o benznidazol e o nifurtimox, foram introduzidos na clínica na década de 70. Ambos os fármacos apresentam boa eficácia quando administrados logo após a infecção, durante a fase aguda da doença, incluindo os casos de transmissão congênita. Entretanto, a eficácia de cura diminui se administrados em uma fase mais tardia e com baixa parasitemia. Com isso, o tratamento da doença de Chagas é considerado limitado durante a fase crônica da infecção.

De acordo com os especialistas, os dados da pesquisa revelam, pela primeira vez, uma nova série de compostos ftalimido-tiazóis com efeitos potenciais contra o T. cruzi. Alguns dos compostos testados apresentaram potente atividade inibitória da forma tripomastigota do parasito em concentração não tóxica a esplenócitos, indicando a seletividade destes. Além disso, o tratamento dos parasitos com compostos ftalimido-tiazóis causou alterações ultraestruturais em diferentes compartimentos celulares incluindo encurtamento do flagelo, condensação da cromatina, inchaço das mitocôndrias, alterações nos reservossomos e dilatação do retículo endoplasmático.

Clique aqui para acessar o artigo publicado em janeiro de 2016.

Pesquisa analisa a presença do Pneumococo em crianças antes da introdução da vacina PCV 10

Estudo coordenado por pesquisadores da Fiocruz Bahia apresenta dados sobre a presença do Pneumococo em crianças antes da introdução da vacina conjugada pneumocócica-10 (PCV 10), no Brasil. Os especialistas realizaram testes para analisar a associação entre os fatores de risco demográficos e as chances de ser colonizado com um sorotipo de alta ou baixa capacidade de causar doença invasiva. Os resultados dessa pesquisa estão no artigo “Nasopharyngeal carriage of Streptococcus pneumoniae among children in an urban setting in Brazil prior to PCV10 introduction”, publicado pelo periódico Vaccine, vinculado a editora científica Elsevier.

Participaram do estudo os pesquisadores da Fiocruz Bahia Jailton Azevedo, Leila Campos, Mitermayer Reis, Albert Ko, Guilherme Ribeiro e Joice Reis e a doutouranda Ana Paula Menezes, em parceria com a Escola Nacional de Saúde Pública (ENSP Fiocruz- RJ), Universidade Federal da Bahia (UFBA), Centers for Disease Control & Prevention, (Atlanta- EUA) e Yale School of Public Health (New Haven- EUA).

O estudo – Os cientistas realizaram a pesquisa com cerca de 200 crianças, com idade inferior a 5 anos, do bairro de Pau da Lima (Salvador), entre janeiro de 2008 e janeiro de 2009. Através de entrevistas com a família destas crianças, os pesquisadores coletaram dados sociodemográficos e de saúde. Também foram recolhidas amostras da cavidade nasal de cada criança e feito o isolamento e análise da bactéria Streptococcus pneumoniae.

Os resultados da pesquisa mostraram uma prevalência de 55% de presença da bactéria Streptococcus pneumoniae na nasofaringe das crianças. Foi detectado, por meio de análise multivariada, que as variáveis associadas à presença da bactéria foi ter contato com três ou mais crianças menores de 2 anos de idade e residir em casas superlotadas, fatores associados também à colonização por sorotipos altamente invasivos.

Segundo os especialistas, a pesquisa fornece informações básicas sobre a presença do pneumococo, que podem ser importantes no monitoramento e avaliação da vacina PCV-10. Os cientistas concluíram que as condições de alta densidade demográfica, fato comum em comunidades, desempenham papel relevante na transmissão do pneumococo. Em outros países, depois da introdução da vacina pneumocócica conjugada, foram observadas mudanças no sorotipo, substituição e expansão de pneumococos por sorotipos não incluídos na vacina. Por isso, é essencial haver um monitoramento dessas comunidades depois da introdução das vacinas.

Clique aqui e leia na íntegra o artigo publicado em dezembro de 2015.

Estudo mostra que número de amastigotas de Leishmania no tecido é maior em fase precoce e tem relação com macrófagos

Publicado no The American Journal of Tropical Medicine na Hygiene, o artigo “Characterization of the Histopathologic Features in Patients in the Early and Late Phases of Cutaneous Leishmaniasis” discute a relação da resposta imune e o surgimento de úlceras em pacientes com leishmaniose cutânea recente e tardia. O trabalho foi publicado pelos pesquisadores da Fiocruz Bahia, Sérgio Arruda, Edgar Carvalho, Lucas Carvalho e Maíra Saldanha, em parceria com a Universidade Federal da Bahia e a Universidade da Pensilvânia (EUA).

Leishmaniose é um termo para designar um espectro de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania transmitida por flebotomíneos infectados. As características clínicas incluem desde a infecção assintomática até úlceras localizadas, disseminadas e, por vezes, com comprometimento de mucosas.

A leishmaniose cutânea caracteriza-se por apresentar lesão ulcerada na sua forma clínica mais comum. Observa-se que antes da úlcera surgir nos pacientes infectados, há o desenvolvimento de um pápula no local da picada do mosquito, e essa fase é conhecida como leishmaniose cutânea precoce.

Após um intervalo que varia de duas a quatro semanas, posterior a formação da pápula, a úlcera típica desenvolve-se. Por mais que haja estudos acerca das respostas imunes de pacientes com leishmaniose cutânea precoce, ainda há poucos trabalhos que tratem da infecção in situ dessas manifestações iniciais e já na fase da úlcera já aberta.

Dessa forma, a equipe realizou um estudo de corte transversal com o intuito de comparar fatores histopatológicos de biópsias de pele de pacientes com manifestações precoces e tardios da leishmaniose cutânea. A equipe avaliou a área infiltrada pelas células, os perfis dessas células bem como necrose tecidual e o número de parasitas.

Constatou-se que o número de parasitas (amastigotas) na lesão recente inicial é maior do que na manifestação tardia. Mostrou-se também a inexistência de uma relação entre o número de parasitas e o tamanho da lesão e a inflamação tecidual. Os pesquisadores concluíram macrófagos e parasitas e se correlacionam com a destruição tecidual e sugerem que os macrófagos estão diretamente relacionados com a imuno patologia das lesões cutâneas causadas por Leishmania braziliensis.

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Estudo de pesquisadora da Fiocruz Bahia repercute na imprensa internacional

Estudos sobre a relação dos vírus da dengue, da zika e da chikungunya com complicações neurológicas em pacientes infectados, realizados pela pesquisadora da Fiocruz Bahia Isadora Siqueira e pelo neurologista e estudante de mestrado da Fiocruz Bahia Mateus do Rosário, tiveram repercussão na imprensa internacional. Os resultados deste estudo, desenvolvido em parceria com pesquisadores dos Estados Unidos, foram apresentados em uma reunião da American Society of Tropical Medicine and Hygiene (Sociedade Americana de Medicina Tropical e Higiene) e repercutiram em veículos como o The Wall Street Journal, NBC News e Science Daily.

As pesquisas trataram da interação e atuação conjunta dos vírus da dengue e da chikungunya com o vírus Zika. As análises mostraram que cada um desses vírus pode ter o potencial de causar diversas complicações neurológicas, algumas muito graves, e os sintomas devem ser monitorados. Os achados de um estudo em andamento, em dois hospitais de Salvador, relatam 21 casos de doenças neurológicas associadas com arbovirus, sendo a maioria delas a síndrome de Guillain-Barré.

Observou-se também casos de encefalite e de dois pacientes, no mesmo hospital, com a rara síndrome de opsoclonus-mioclonos (ou síndrome de Kinsbourne). Um deles testou positivo para zika e dengue, enquanto o outro tinha chikungunya e dengue. “O que é difícil de determinar é se ter uma coinfecção com dois desses vírus aumenta o risco de problemas neurológicos. Nós ainda estamos avaliando o caso de um paciente que foi infectado com ambos, dengue e chikungunya”, afirmou Isadora Siqueira.

Estes estudos sobre a síndrome de Guillain-Barré também resultaram no artigo Case Report: Guillain–Barré Syndrome after Zika Virus Infection in Brazil, assinado pelos pesquisadores da Fiocruz Bahia, que traz relatos de dois casos de pacientes infectados pelo vírus zika, que apresentaram sintomas da síndrome de Guillain-Barré. Foi detectada, através de testes diagnósticos, a presença de anticorpos IgM específicos para o vírus Zika, confirmando a infecção pelo vírus associado ao surgimento dos sintomas da síndrome.

Pesquisa associa país de residência de infectados pelo HIV a assinaturas de biomarcadores inflamatórios distintos

Publicado na edição de janeiro deste ano, no periódico científico “Journal of Virus Eradication”, o artigo “Country of residence is associated with distinct inflammatory biomarker signatures in HIV-infected patients” é assinado pelo pesquisador da Fiocruz Bahia, Bruno Andrade. Na publicação, investiga-se a relação entre o país de residência e os biomarcadores em pacientes portadores do HIV. O pesquisador Bruno Andrade coordenou as análises estatísticas deste estudo internacional.

Diversas pesquisas têm apontado que biomarcadores de inflamação e coagulação são considerados preditores de mortalidade e morbidade em pacientes soropositivos para HIV. Os marcadores IL-6, D-dimer, CRP e sCD14, além de estarem associados a diversas causas de mortalidade, apresentam também relação com patologias cardiovasculares.

Outras pesquisas, por sua vez, têm demonstrado que o perfil inflamatório de doenças cardíacas, associadas a biomarcadores, tende a variar em relação a localização geográfica e etnia dos pacientes infectados. Contudo, os efeitos de fatores locacionais no perfil inflamatório de pacientes soropositivos permaneciam desconhecidos.

Para responder a esta lacuna de conhecimento, os pesquisadores analisaram amostras plasmáticas crioconservadas de 267 pacientes em terapia antirretroviral: 124 oriundos do México e 143 da África do Sul, em similares estágios de infecção do HIV, destacando fatores como nacionalidade, gênero e coinfecção com tuberculose.

Em relação ao perfil inflamatório, a análise constatou que o efeito locacional, no caso o país de residência, teve um peso maior na determinação do padrão de expressão de biomarcadores maior do que a de fatores como gênero e coinfecção. A equipe chegou à conclusão de que biomarcadores de coagulação e inflamação variam significativamente em cada país. Por conseguinte, essas discrepâncias podem contribuir para diferenças na patogênese e prognóstico do HIV em diferentes populações.

O trabalho foi uma cooperação entre Brasil: Fiocruz Bahia, Fundação José Silveira, Faculdade de Tecnologia e Ciências (FTC); Estados Unidos: National Institutes of Health (NIH), Leidos Biomedical Reserach, Duke University, e Case Western Reserve University ; México : Instituto Nacional de Ciencias Medicas y Nutricion, Universidad Nacional Autonoma de Mexico e África do Sul: University of the Witwatersrand.

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American Journal of Tropical Medicine and Hygiene publica relato de caso de pacientes com Guillain-Barré após infecção por Zika

O artigo intitulado Case Report: Guillain–Barré Syndrome after Zika Virus Infection in Brazil, publicado no periódico científico American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, em 19 de setembro, relata o caso de dois pacientes vítimas da síndrome de Guillain-Barré, após serem infectados pelo vírus Zika durante o grande surto no Brasil, em 2015. O estudo conduzido pela pesquisadora da Fiocruz Bahia, Isadora Siqueira, foi realizado em parceria com especialistas do Instituto Evandro Chagas e das universidades americanas University of Texas e Yale School of Public Health, com a colaboração do Hospital Geral Roberto Santos e do Hospital São Rafael, ambos de Salvador (BA).

O Zika é um flavivírus transmitido pelo mosquito Aedes aegypti. O primeiro caso registrado de infecção pelo Zika data de 1954, na Nigéria. O primeiro surto de larga escala foi registrado em 2007, na Micronésia e, nos anos de 2013 e 2014, ocorreram surtos na Polinésia Francesa e na Nova Caledônia, respectivamente. No Brasil, o surto de Zika iniciou-se em março de 2015, tendo rápida disseminação por outros países das Américas Central e do Sul.

Neste período, apenas em Salvador foram registrados mais de 17.000 casos de suspeita de infecção por Zika e 44 casos da síndrome. Desses 44 casos, 32 (73%) relataram ter tido uma doença prodrômica aguda, compatível com a infecção por Zika, e diversos pacientes infectados pelo vírus desenvolveram a síndrome de Guillain-Barré, que é a maior causa de paralisia flácida generalizada no mundo, de acordo com o Ministério da Saúde. A síndrome tem como principais sintomas a paralisia dos membros, dor neuropática lombar ou nas pernas e fraqueza progressiva.

O primeiro relato de caso descrito no artigo foi de uma mulher, de 49 anos, com exantema maculpapular e mialgia sem febre, apresentando tetraparesia, perda de movimento nos quatro membros, paralisia bifacial e parestesias, ao longo de 9 dias de internação em unidade de tratamento intensivo (UTI). O segundo foi um homem, de 22 anos, com sintomas de exantema maculpapular generalizado, moderada artralgia, tetraparesia e paralisia bifacial, além de outros distúrbios sensoriais e neurológicos, ao longo de 24 dias de internação em UTI. Apesar da severidade das apresentações clínicas, nenhum deles precisou de ventilação mecânica ou faleceu.

Conclusões – Durante o acompanhamento dos pacientes, os autores do estudo detectaram, através de testes diagnósticos, a presença de anticorpos IgM específicos para o Zika, confirmando a infecção pelo vírus associado ao surgimento dos sintomas da síndrome de Guillain-Barré. Levando em conta as evidências, os pesquisadores afirmaram que a relação entre o Zika e as complicações neurológicas resulta em preocupação com consequências dramáticas para a saúde pública.

A investigação destes dois casos também serve como um alerta para os clínicos em regiões da América do Sul, Central e Caribe, onde o vírus se propagou recentemente, do risco potencial da Guillain-Barré e a necessidade de detecção, diagnóstico, além de tratamento e cuidados de suporte para prevenir a mortalidade e sequelas de longo prazo. Os pesquisadores ressaltam que outros estudos imunopatológicos ainda são necessários para uma melhor compreensão desta síndrome.

O artigo pode ser acessado clicando aqui.