Autoria: Antônio Carlos de Albuquerque Bandeira
Orientação: Maria Fernanda Rios Grassi
Título da tese: “PERFIL CLÍNICO-LABORATORIAL E DA IMUNIDADE CELULAR DE PACIENTES COM INFECÇÃO AGUDA PELO VÍRUS ZIKA (ZIKV)”.
Programa: Pós-Graduação em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa
Data de defesa: 1º/10/2021
Horário: 15h00
Local: Sala virtual do Zoom

RESUMO

Introdução: As manifestações clínicas e laboratoriais da infecção pelo vírus da Zika (ZIKV) eram desconhecidas quando a doença passou a ser identificada no Brasil em 2015. Os relatos clínicos eram baseados em pequenas séries de casos e o diagnóstico de ZIKV era baseado em técnicas sorológicas que apresentavam reação cruzada com anticorpos anti-vírus da Dengue (DENV). Além disso era necessário caracterizar a resposta imune celular em pacientes com quadros agudos de ZIKV, muito pouco estudada até o início do presente estudo. Objetivo: Descrever as manifestações clínicas, os achados laboratoriais, e a resposta imune celular de pacientes com infecção aguda pelo ZIKV. Metodologia: Foi realizado um estudo descritivo clínico de corte transversal com pacientes selecionados em um pronto atendimento na cidade de Salvador. Foram avaliados sequencialmente os pacientes com quadro sugestivo de infecção viral aguda entre 27 de maio de 2015 e 31 de agosto de 2017. O diagnóstico de ZIKV foi baseado na positividade ao rt-PCR no sangue ou urina ou saliva. Os pacientes também foram avaliados para infecção por Dengue ou Chikungunya (CHIKV) através do rt-PCR. Foi aplicado questionário para coleta de informações clínicas e laboratoriais. A fim de avaliar a resposta imune celular específica ao ZIKV, células mononucleares do sangue periférico (PBMC) foram obtidas de alguns pacientes no momento da inclusão no estudo (fase 1, P1) e após 15 dias (fase 2, P2). A partir do PBMC, foi avaliada a produção de interferongama em resposta a peptídeos recobrindo as proteínas do ZIKV, DENV e CHIKV por ELISPOT. A avaliação da assinatura imunológica dos linfócitos T foi realizada por citometria de massa (Cytof), utilizando um painel de 40 anticorpos. Resultados: Foram incluídos 78 pacientes no estudo clínico, sendo 66,7% do sexo feminino e média de idade de 38 anos. Os achados clínicos mais frequentes foram mialgia, artralgia e febre baixa. A análise laboratorial demonstrou níveis normais de hematócrito, plaquetas e enzimas hepáticas.. No estudo da resposta imune celular foram incluídos 29 indivíduos: 11 infectados por ZIKV, 11 por CHIKV, e 7 doadores de sangue como controles. Três dos 11 pacientes com ZIKV (27,3%) tiveram uma resposta de células T detectável aos peptídeos do ZIKV (C, NS2A, NS4A e NS5). A magnitude média das respostas anti-ZIKV foi de 89 SFC / 106 PBMC [IQR: 79-156]. NS5 foi a proteína imunodominante que foi reconhecida na maioria dos respondendores (5/9, 55,6%). Para análise de linfócitos T CD4 + a proporção de células que expressaram IFN-gama foi significativamente maior em todas as subpopulações de TCM, memória efetora (TEM) (CD45RA-CD27 + CCR7-) e memória de transição (TTM) (CD45RA-CD27 + CCR7-) de pacientes na fase P1 em comparação a fase P2 e controles saudáveis (p <0,005). Para o perfil de linfócitos T CD8 +, expansão das subpopulações TN, TCM, TEM, TEMRA e menor proporção da subpopulação TTM foram observados nos pacientes na fase P1 em comparação a controles saudáveis. Os pacientes na fase P2 exibiram uma proporção menor das subpopulações TEM e TEMRA em comparação com pacientes na fase P1. Conclusão. Os pacientes com ZIKV apresentarm manifestações clínicas leves e inespecíficas, com uma resposta imune celular de baixa intensidade e dirigida predominantemente para antígenos não-estruturais.
Palavras-Chave: Zika; manifestações clínicas; resposta imune celular; Elispot; citometria de massa.