Autoria: Jéssica Mariane Ferreira Mendes
Orientação: Clarissa Araújo Gurgel Rocha
Título da tese: “Efeitos do IGF-1 na proliferação, invasão, angiogênese e população de células-tronco tumorais e modulação das vias hedgehog e P13K-AKT em carcinoma escamocelular oral”.
Programa: Pós-Graduação em Patologia Humana- UFBA /FIOCRUZ
Data de defesa: 09/01/2020
Horário: 13h30

RESUMO

O carcinoma escamocelular oral (CEO) é o tumor mais frequente da região de cabeça e pescoço, constituindo um importante problema de saúde pública no Brasil, especialmente pela sua significante morbi-mortalidade. O estudo da biologia deste tumor ainda apresenta inúmeras lacunas, com reflexo nos poucos avanços relacionados à terapêutica desta doença nas últimas décadas. Portanto, é fundamental investigar o papel de vias de sinalização em CEO, visando elucidar os mecanismos de progressão tumoral e quimiorresistência. A via PI3K-AKT é uma das mais importantes para a tumorigênese, assim como a via Hedgehog (HH), cuja associação com o desenvolvimento e progressão do CEO é consistente na literatura. Entretanto não é completamente compreendida a interação entre AKT-HH, e como esta comunicação contribui para: proliferação, invasão, angiogênese e pluripotência. Portanto, o estudo de moléculas que ativam as duas vias, pode levar à identificação de potenciais novos alvos terapêuticos. Trabalhos apontam para a relação entre a expressão do fator de crescimento semelhante à insulina-1 (IGF-1) em células estromais com a ativação não-canônica da via HH e manutenção da atividade de AKT, contribuindo desta forma, para o comportamento mais agressivo dos tumores.  Porém a participação do IGF-1 na patogênese do CEO ainda não está clara.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do IGF-1 na expressão de proteínas das vias HH e PI3K-AKT, além de sua participação em eventos pró-tumorigênicos como: proliferação, angiogênese, migração, invasão e estabelecimento de células-tronco tumorais in vitro.

MATERIAL E MÉTODOS: Fibroblastos de pele (MF1) foram geneticamente modificados para superexpressão de IGF-1 por transdução lentiviral (MF1-IGF-1). As células SCC-4 foram incubadas com meio condicionado (MC) de fibroblastos ou rIGF-1 para avaliação da proliferação, migração, expressão de genes de pluripotência, formação de esferas tumorais e identificação de proteínas das vias AKT e HH. O MC também foi usado para o ensaio de angiogênese, feito em linhagem endotelial EA.hy926. Condições de co-cultivo (fibroblastos e SCC-4) foram adotadas para imunomarcação de fatores de pluripotência e da via HH. Fibroblastos e SCC-4 foram semeadas nos diferentes compartimentos do transwell para avaliação da invasão.

RESULTADOS: A análise da expressão gênica confirmou a superexpressão de IGF-1 em MF1-IGF-1 e ausência de mRNA para IGF-1 em SCC-4, porém, estas células apresentaram alta expressão do IGF1R. Foi observado o ligante Ihh em MF1 e MF1-IGF-1, e aumento de mRNA de GLI1 em SCC-4 estimuladas com CM MF1. Proteínas das vias HH (GLI1, Ihh e SMO) e AKT (AKT total e fosforilado) foram identificadas em SCC-4 cultivadas na presença de MC MF-1-IGF1. rIGF-1 promoveu: proliferação, migração, invasão e formação de esferas tumorais. MC MF1 foi o estímulo mais importante para a angiogênese.

CONCLUSÕES: rIGF-1 exerceu efeitos pró-tumorigênicos em SCC-4 (proliferação, migração, invasão e esferas tumorais). Porém MC MF1 teve maior influência sob a angiogênese e expressão gênica de GLI1. Proteínas das vias AKT e HH foram identificadas em SCC-4 frente aos diferentes estímulos, sugerindo que a regulação destas vias pelo IGF-1 pode se relacionar aos eventos observados. Entretanto, mais estudos são necessários para comprovar esta relação.

Palavras-chave: IGF-1, Hedgehog, PI3-AKT, carcinoma escamocelular oral.