PGBSMI – DEFESA DE TESE:“AVALIAÇÃO DO ELISA SANDUÍCHE DUPLO-ANTÍGENO COMO FERRAMENTA DIAGNÓSTICA PARA DETECÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-T. cruzi: UM ESTUDO DE FASE II”

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Aluna: Nátalia Erdens Maron de Freitas

Orientador: Dr. Fred Luciano Neves Santos

Programa: Pós-graduação Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa

Título da Tese: “AVALIAÇÃO DO ELISA SANDUÍCHE DUPLO-ANTÍGENO COMO FERRAMENTA DIAGNÓSTICA PARA DETECÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-T. cruzi: UM ESTUDO DE FASE II”

Data: 30/09/2025

Horário: 9H

Local: Sala de Videoconferência (presencial)

Virtual: Sala virtual Zoom Educacional 03

ID da reunião: 828 7082 0837

Senha: natalia

Titulares:

Dra. Glaucia Elisete Barbosa Marcon – Fiocruz/Pantanal

Dra. Isadora Cristina de Siqueira – IGM /FIOCRUZ

Dra. Deborah Bittencourt Mothé – IGM /FIOCRUZ

Suplente

Dr. Luciano Kalabric Silva – IGM /FIOCRUZ

RESUMO:

Introdução. O diagnóstico da doença de Chagas (DC) na fase crônica é baseado em testes sorológicos, como o ELISA indireto, que apresenta limitações devido ao uso de anticorpos secundários IgG anti-humanos marcados com peroxidase. O ELISA sanduíche duplo-antígeno (DAgS-ELISA) surge como alternativa, pois utiliza o próprio antígeno marcado com peroxidase como agente de detecção, permitindo a identificação da DC independentemente da fase da doença e da origem do soro. Objetivo. Avaliar o desempenho diagnóstico dos antígenos recombinantes quiméricos do T. cruzi (IBMP-8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4) através do DAgS-ELISA para a detecção da DC crônica humana. Material e Métodos. Os antígenos foram conjugados à peroxidase pelo método da hidrazona e otimizados por checkerboard titration. 801 amostras (402 positivas e 399 negativas) foram analisadas, previamente caracterizadas por ELISA indireto e quimiluminescência. Os parâmetros avaliados incluíram área sob a curva (AUC), sensibilidade, especificidade, acurácia, odds ratio, razões de verossimilhança e índice Kappa de Cohen. (κ). Resultados. Os resultados do estudo de fase II indicaram que o antígeno IBMP-8.4 apresentou o melhor desempenho, com a maior AUC (99,77%) e a maior sensibilidade (99,75%), enquanto o IBMP-8.3 apresentou a maior especificidade (99,0%). Os valores de sensibilidade foram de 84,09%, 92,79%, 84,58% e 99,75%, respectivamente. A especificidade foi de 91,94%, 92,23%, 99,0% e 97,99%, respectivamente. O IBMP-8.4 apresentou o maior valor de acurácia (98,88%). A análise de odds ratio diagnóstica destacou o IBMP-8.4 como o mais discriminatório. A combinação em série resultou em altas especificidades, porém baixas sensibilidades, enquanto a análise em paralelo aumentou a sensibilidade. A análise de reatividade cruzada mostrou que o IBMP-8.4 teve a menor reatividade. Conclusão. Os quatro antígenos avaliados neste estudo demonstraram elevada capacidade diagnóstica através do DAgS-ELISA, com destaque para a avaliação em paralelo utilizando o conjunto IBMP-8.3/IBMP-8.4.

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