AUTORIA: Letícia Oliveira Simões
ORIENTAÇÃO: Darísy Flávia Silva Amorim
TÍTULO DA DISSERTAÇÃO: “ALTERAÇÕES MORFOFUNCIONAIS CARDÍACAS INDUZIDAS PELO VENENO DA CROTALUS DURISSUS CASCAVELLA – SERPENTE DE ALTA PREVALÊNCIA NO ESTADO DA BAHIA” 
PROGRAMA: Pós-Graduação em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa (Fiocruz)
DATA DE DEFESA: 25/02/2019

RESUMO

Introdução: O veneno de Crotalus durissus cascavella (CDC) pode ser uma fonte de bioprospecção para novos agentes terapêuticos com ação cardiovascular, porém, não são inteiramente compreendidos os efeitos biológicos induzidos em tecido cardíaco.

Objetivos: Investigar as influências dos venenos CDC sobre a atividade cardíaca de ratos e seus possíveis mecanismos de ação envolvidos.

Métodos: Átrio isolado de ratos machos wistar e espontaneamente hipertensos (SHR) (12-16 semanas) foram mantidos num banho para órgãos com solução de Krebs-bicarbonato, e após um período de estabilização, CDC (0,1-30 μg /ml) foi adicionado cumulativamente ao banho de órgãos. Alterações na contratilidade dos cardiomiócitos foram avaliadas por meio da técnica de alteração de comprimento do cardiomiócito, usando-se um sistema de detecção de bordas. Cardiomiócitos de rato da linhagem H9c2 foram utilizados para avaliar a citotoxicidade do composto em células de mamífero em diferentes concentrações (0,37-30 μg/ml). Para a quantificação da atividade enzimática da cinase de creatina total (CK), amostras de krebs foram recolhidas antes e depois da adição do veneno no banho de órgãos e quantificado usando um kit de ensaio disponível comercialmente. Análises morfológicas e na ultraestrutura do cardiomiócito foram realizadas para investigar algum tipo de lesão cardíaca. As influências de CDC sobre a atividade elétrica cardíaca foram investigadas através sistema de Langendorff. O mecanismo de ação do efeito cardíaco de CDC foi investigado em tecido atrial na presença de Epinefrina (10 μM), Propranolol (10 μM), L-NAME (100 μM); PTIO (100 μM); ODQ (10μM) e KT5823 (1μM). Avaliação dos efeitos de CDC sobre a hemodinâmica de ratos não-anestesiados e sobre o ECG foram realizados no set de experimentos in vivo. Os ensaios realizados foram aprovados pela CEUA (CEUA-ICS/UFBA n°072/2014). As análises estatísticas foram feitas utilizando teste t de Student ou análise de variância “one-way” (ANOVA) seguido de teste de Bonferroni, quando apropriado utilizando o GraphPadPrism 6.0® (EUA).

Resultados: O CDC induziu um efeito inotrópico negativo em átrio isolado de rato, assim como reduziu a contratilidade em cardiomiócito isolado. CDC nas concentrações de 7,5, 15 e 30 μg/ml não induziu alteração significante da proliferação celular de cardiomiócitos. O tratamento dos átrios de ratos com CDC (30 μg/ml), não alteraram de maneira significante os níveis de CK-Total e de CK-MB em solução fisiológica contendo tecido atrial. Adicionalmente, o veneno CDC não induziu alterações morfológicas nem ultraestruturais importantes assim como a eletrogênese cardíaca avaliado através do sistema de Langendorff. CDC não foi capaz de induzir efeito inotrópico negativo em átrio isolado na presença de L-NAME, PTIO, ODQ e KT5823. Em ratos não anestesiados CDC induziram uma hipotensão seguido de bradicardia, essa ultima sendo também observado em ECG em animais anestesiados. CDC não foi induziu nenhum efeito em átrio isolado de ratos hipertensos.

Conclusão: Esses dados em conjunto demonstram que o efeito cardíaco de CDC possa ser devido a um mecanismo não tóxico, e depender da via NO/GMPc/PKG para induzir seu efeito inotrópico negativo.

Palavras-chave: Crotalus durissus cascavella; cardiotoxicidade; coração; inotropismo negativo