Autoria: Igor Muller da Silva Santos
Orientação: Adriano Queiroz Silva
Título da dissertação: “ALTERAÇÕES NA HOMEOSTASE LIPÍDICA EM MACRÓFAGOS ESTIMULADOS POR LIPÍDIOS DO MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS”
Programa: Pós-Graduação em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa
Data de defesa: 10/02/2021
Horário: 09h
Local: Sala Virtual do Zoom | ID da reunião: 997 3813 7091

RESUMO

INTRODUÇÃO: O Mycobacterium tuberculosis (Mtb), agente causador da Tuberculose (TB), é capaz de modular metabolicamente o macrófago, induzir a formação de corpos lipídicos e persistir em uma infecção latente. Alterações no conteúdo de lipídios na parede celular do Mtb, desencadeadas pela repressão do operon mce1, são responsáveis por modulara resposta inflamatória em macrófagos murinos e em células T humanas. Entretanto, o papel desses lipídios na regulação do metabolismo de lipídios em macrófagos ainda é pouco compreendido. OBJETIVO: Esse trabalho tem como objetivo avaliar alterações no metabolismo de lipídios em macrófagos cultivados com extratos lipídicos das cepas de Mtb selvagem (WT) e mutante no operon mce1(∆mce1). MATERIAL E MÉTODOS: Para isso, estimulamos macrófagos RAW 264.7 com os extratos lipídicos das cepas WT e ∆mce1, e avaliamos a formação de corpos lipídicos e os níveis de expressão de genes envolvidos no metabolismo e armazenamento de lipídios. Além disso, quantificamos os transcritos de genes responsáveis por codificar citocinas pró-inflamatórias e pela síntese de eicosanoides. Finalmente, a produção de Prostaglandina E2(PGE2) e Leucotrieno B4(LTB4) em sobrenadante desses macrófagos estimulados foi determinada. RESULTADOS: Ambos os extratos lipídicos induziram de forma semelhante a formação de corpos lipídicos mas demonstraram capacidade distintas de estimular a expressão dos genes envolvidos na síntese e transporte de lipídios no macrófago. Com relação aos controles não estimulados, enquanto que os lipídios da cepa WT regularam a expressão de Dgat1 e Dgat2 em 2,1 e 2,5 vezes, genes envolvidos no armazenamento de triacilglicerol, os lipídios da cepa ∆mce1 aumentaram 3,5 vezes a expressão do gene Dhcr7, envolvido na síntese de colesterol. Quanto à produção de mediadores lipídicos, os lipídios da cepa WT induzem desbalanço na produção de LTB4 e PGE2. Enquanto os lipídios da cepa WT induziram aumento de 26 vezes na produção de PGE2, os lipídios da cepa ∆mce1 modularam significativamente esse processo (p<0,01). Os lipídios da cepa da cepa ∆mce1 também foram capazes de modular a expressão de Cox-2, Il-1βe Tnf-α mesmo na presença de lipídios da cepa selvagem. CONCLUSÃO: Nossos resultados indicam um papel modulador dos lipídiosdo Mtb na formação de macrófagos espumosos, no metabolismo e armazenamento de lipídiose na resposta inflamatória desses macrófagos. Palavras-chave: Tuberculose, lipídios, operon mce1, corpos lipídicos, eicosanoides.